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細胞培養操作過程要使用超淨工作台
发布时间:2012-06-11 06:05:39   浏览:5949

細胞培養操作過程要使用超淨工作台

目的:建立一套適用的培養操作規程,進行無汙染條件下體外細胞擴大培養。

主體內容:
操作步驟:
1、紫外燈照射超淨工作台30分鍾(根據實際情況,可適當延長或縮短照射時間,但時間長一點總比時間短一點安全。)


2、將培養液、PBS、胰酶放在37℃水浴中溫育(每次用多少,溫育多少,這樣既可節約溫育的時間,又可延長藥品的使用期限。)


3、超淨工作台照射30分钟后,关闭紫外,打开照明,打开排风10分钟后再次进入细胞培养室。(注意:要打开排风10分钟后再进行操作,这样才能保证循环的风是无菌的。同时还会避免有菌的风直接吹到人的呼吸道中,对人体也有一定的保护作用)


4、戴上口罩及手套(有條件的最好戴上帽子,不過也沒關系,我們實驗室就沒戴)


5、用70-75%的酒精擦试实验物品,然后拿入超淨工作台中。


6、操作時注意以下幾點:盡量在酒精燈火焰附近操作,但如果管子裏有細胞就要離火焰有一定距離了,否則細胞要燙死了;不要重複使用移液管(即吸一次後,就換新的管);不要在敞開的容器上方操作;手上的酒精不要擦太多,否則靠近酒精燈時容易把手燒到(我想很多人都有過被燒的經曆吧);


其實操作是很簡單的,但一定要仔細。尤其是第2步許多人都不注意,細胞平時放在37℃培養,如果加入的PBS或胰酶溫度太低,會對細胞有操傷的,雖然這種損傷短期內察覺不到,但時間長了,就會顯現出來。

來源:/   苏布会-13570963006

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